Ankara tekesi sperması dondurulmasında polivinil alkolün spermatozoa canlılığı ve fonksiyonu üzerine etkisi
No Thumbnail Available
Files
Date
2017
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Sağlık Bilimleri Enstitüsü
Abstract
Sentetik polimer polivinil alkolün (PVA) küçük konsantrasyonlarının kriyoprotektan solüsyonlarında buz oluşumunu inhibe ettiği bulunmuştur. Bu araştırmada, 3 farklı moleküler ağırlıktaki polivinil alkol (PVA) ile farklı konsantrasyonlarının Ankara keçisi spermasının dondurulabilirliğini değerlendiren bir metodoloji tanımlamayı amaçlanmıştır. Çalışma öncesinde PVA'ün sperma üzerinde sitotoksiste incelemesi MTT ve Neutral Red testi ile belirlendi. Sperma sulandırıcısının çekirdeklenme sıcaklığı HD kamera (JVC, everio HDAVC) ve testo termometresi (Testo 926, Almanya) ile kaydedildi. Çalışmada kullanılan hayvanların seçimi bütünleştirilmiş androlojik muayene sistemine (BAMS) göre yapıldı. Erkek üreme organlarının ölçümleri, elektronik kumpas (Watan, Türkiye), skrotal çevre mezüro ile (Mesitaş, Türkiye) ve görüntülemeler ultrason (MyLabVetTM One, ESAOTE S.p.A.) ile gerçekleştirildi. Spermatolojik parametrelerin belirlenmesi için spermalar transrektal dijital masaj ile alındı. Toplamda 24 hayvana uygulanan BAMS sonrasında, yedi adet olgun Ankara (2,75 ± 1,42 yaş) tekesinden 75 ejakülat suni vajen yardımıyla hafta iki kez toplandı. Sperma alınmasından hemen sonra, taze spermatolojik parametreler kaydedildi. Sperm üç farklı PVA kopolimer 9, 18 ve 100 kDa ile sulandırıldı; Tris yumurta sarısı sulandırıcısına sırasıyla % 0,001, 0,01, 0,1, 1 ve 2 PVA eklenmiştir. Sulandırma sonrası, örnekler 3 saat + 4 ° C ekilibrasyona bırakıldı. Soğutulan örnekler otomoatik sperma doldurma ve kapatma cihazı ile paketlendi ve programlanabilir dondurma makinesi (Digitcool 5300, IMV, Fransa) içinde donduruldu. Çözüm sonrasında aşağıdaki parametreler değerlendirildi: Motilite, progresivite ve kinetik parametreler SCA (Sperm class analyser, Microptics, Spain) ile, canlı spermatozoa, intakt akrozom ile mitokondriyel aktivite plaka okuyucu (SpectraMax® MiniMax ™ 300 Görüntüleme Sitometresi, ABD) ile değerlendirildi. Çözüm sonu en yüksek motilite, doz gruplarından bağımsız olarak en yüksek PVA (18kDa) 67,72 ± 3,06; doza göre ise PVA (18kDa) %0,1 64,18 ± 1,36; gruplarında elde edildi (P<0,001). Tüm PVA türevlerinin diğer doz gruplarında PVA % 0,001; 0,01; 0,1 ise (PVA 100, % 0,1 hariç) kontrole göre daha yüksek çözüm sonu değerler elde edildi (P<0,001). Çalışmada elde edilen canlı spermatozoa açısından farklı PVA türevleri ve doz grupları arasında bir istatistiksel bir farklılık gözlemlenmiştir (P>0,694; 0,953). Canlı spermatozoa oranları PVA 9, 18 ve 100 için sırasıyla 82,17 ± 1,01; 83,453 ± 1,175; 82,424 ± 1,083 olarak tespit edildi. Kullanılan üç PVA konsantrasyonunun hiçbiri, çözüm sonu spontan AR'nunu indüklememiştir (P>0,001). Grup ve doz etkisinden bağımsız olarak intakt akrozom oranları PVA 9, 18 ve 100 için sırasıyla; 10,83 ± 0,92; 12 ± 1,02; 10,97 ± 0,97 olarak bulundu (P>0,659; 0,975). Sentetik PVA polimerleri buz bloke edici maddeler olarak antifriz proteinlerinden çok daha ucuza üretilebilir ve sperm kriyoprezervasyonunu iyileştirmek için yeni fırsatlar sunabilirler. PVA 100 kDa eklenmesi sperm kinetik parametreler için yararlı iken, PVA 18 kDa grubu ile daha uygun hareket özellikleri elde edilmiştir. % 0,001, 0,01, 0,1 ve 1 w/w'lik (FTS: PVA) PVA kopolimer konsantrasyonları, 100 ml'lik bir hacimde spermanın dondurulması için gereken gliserol konsantrasyonunu sırasıyla % 0, 1, 1 ve 2 w/w düşürmüştür.
Description
Keywords
Ankara tekesi, polivinil alkol